Անցյալ շաբաթ մենք կիսեցինք մի քանի նկատառումներ՝ ցելյուլոզային ացետատի մեմբրանի էլեկտրոֆորեզի օգտագործման վերաբերյալ, և մենք այսօր կավարտենք այս թեման այստեղ՝ ձեր հղումի համար:
Ընտրություն Բուֆերային կոնցենտրացիան
Բուֆերային կոնցենտրացիան, որն օգտագործվում է ցելյուլոզային ացետատի մեմբրանի էլեկտրոֆորեզում, ընդհանուր առմամբ ավելի ցածր է, քան թղթի էլեկտրոֆորեզում օգտագործվողը:Սովորաբար օգտագործվող pH 8.6Bարբիտալ բուֆերը սովորաբար ընտրվում է 0,05 մոլ/լ-ից 0,09 մոլ/լ միջակայքում:Կոնցենտրացիան ընտրելիս կատարվում է նախնական որոշում։Օրինակ, եթե էլեկտրոֆորեզի խցիկում էլեկտրոդների միջև մեմբրանի շերտի երկարությունը 8-10 սմ է, մեմբրանի երկարության մեկ սանտիմետրի համար պահանջվում է 25 Վ լարում, իսկ ընթացիկ ինտենսիվությունը պետք է լինի 0,4-0,5 մԱ մեմբրանի լայնության մեկ սանտիմետրի համար:Եթե էլեկտրոֆորեզի ընթացքում այս արժեքները չեն հասնում կամ գերազանցվում, ապա բուֆերի կոնցենտրացիան պետք է ավելացվի կամ նոսրացվի:
Բուֆերային չափազանց ցածր կոնցենտրացիան կհանգեցնի ժապավենների արագ շարժմանը և ժապավենի լայնության ավելացմանը:Մյուս կողմից, չափազանց բարձր բուֆերային կոնցենտրացիան կդանդաղեցնի տիրույթի միգրացիան՝ դժվարացնելով առանձնացման որոշակի գոտիների տարբերակումը:
Հարկ է նշել, որ ցելյուլոզացետատային թաղանթային էլեկտրոֆորեզում հոսանքի զգալի մասն անցկացվում է նմուշի միջով, որն առաջացնում է զգալի քանակությամբ ջերմություն։Երբեմն, ընտրված բուֆերային կոնցենտրացիան կարող է տեղին համարվել:Այնուամենայնիվ, շրջակա միջավայրի ջերմաստիճանի բարձրացման կամ ավելի բարձր լարման պայմաններում ջրի գոլորշիացումը ջերմության պատճառով կարող է ուժեղանալ, ինչը հանգեցնում է չափազանց բարձր բուֆերի կոնցենտրացիայի և նույնիսկ պատճառելով թաղանթի չորացումը:
Նմուշի ծավալը
Ցելյուլոզացետատային թաղանթային էլեկտրոֆորեզում նմուշի ծավալի քանակը որոշվում է տարբեր գործոններով, ներառյալ էլեկտրոֆորեզի պայմանները, բուն նմուշի հատկությունները, ներկման մեթոդները և հայտնաբերման մեթոդները:Որպես ընդհանուր սկզբունք, որքան ավելի զգայուն է հայտնաբերման մեթոդը, այնքան փոքր կարող է լինել նմուշի ծավալը, ինչը ձեռնտու է տարանջատման համար:Եթե նմուշի ծավալը չափազանց մեծ է, ապա էլեկտրոֆորետիկ տարանջատման օրինաչափությունները կարող են պարզ չլինել, և ներկումը կարող է նաև ժամանակատար լինել:Այնուամենայնիվ, տարանջատված ներկված շերտերը քանակականորեն վերլուծելիս՝ օգտագործելով էլյուցիոն գունամետրիկ հայտնաբերման մեթոդները, նմուշի ծավալը չպետք է չափազանց փոքր լինի, քանի որ դա կարող է հանգեցնել որոշակի բաղադրիչների ներծծման ավելի ցածր արժեքների, ինչը կհանգեցնի դրանց պարունակության հաշվարկման ավելի մեծ սխալների:Նման դեպքերում նմուշի ծավալը պետք է համապատասխանաբար մեծացվի:
Սովորաբար, նմուշի կիրառման գծի յուրաքանչյուր սանտիմետրի վրա ավելացված նմուշի ծավալը տատանվում է 0,1-ից մինչև 5 մկլ, որը համարժեք է 5-ից 1000 մկգ նմուշի քանակին:Օրինակ, սովորական շիճուկ սպիտակուցի էլեկտրոֆորեզի վերլուծության ժամանակ կիրառման գծի յուրաքանչյուր սանտիմետրի վրա ավելացված նմուշի ծավալը սովորաբար չի գերազանցում 1 μL-ը, որը համարժեք է 60-80 մկգ սպիտակուցին:Այնուամենայնիվ, նույն էլեկտրոֆորեզի մեթոդով լիպոպրոտեինները կամ գլիկոպրոտեինները վերլուծելիս անհրաժեշտ է համապատասխանաբար ավելացնել նմուշի ծավալը:
Եզրափակելով, ամենահարմար նմուշի ծավալը պետք է ընտրվի հատուկ պայմանների հիման վրա՝ մի շարք նախնական փորձերի միջոցով:
Գունավորման լուծույթի ընտրություն
Ցելյուլոզացետատի մեմբրանի էլեկտրոֆորեզում առանձնացված շերտերը սովորաբար ներկվում են հայտնաբերումից առաջ:Նմուշի տարբեր բաղադրիչները պահանջում են ներկման տարբեր մեթոդներ, և ցելյուլոզացետատային թաղանթային էլեկտրոֆորեզի համար հարմար ներկման մեթոդները կարող են լիովին կիրառելի չլինել ֆիլտրի թղթի համար:
Գոյություն ունեն ներկման լուծույթ ընտրելու երեք հիմնական սկզբունքցելյուլոզային ացետատ թաղանթ.Նախ,Ջրում լուծվող ներկերը պետք է նախընտրելի լինեն սպիրտում լուծվող ներկերի նկատմամբ՝ խուսափելու համար թաղանթի կծկվելուց և դեֆորմացիայից, որն առաջանում է վերջինիս ներկման լուծույթից։Գունավորումից հետո կարևոր է թաղանթը ողողել ջրով և նվազագույնի հասցնել ներկման տևողությունը:Հակառակ դեպքում, թաղանթը կարող է ոլորվել կամ կծկվել, ինչը կազդի հետագա հայտնաբերման վրա:
Երկրորդ, նմուշի համար նախընտրելի է ընտրել ներկանյութեր, որոնք ունեն ուժեղ ներկման մերձեցում:Շիճուկի սպիտակուցների ցելյուլոզացետատային թաղանթային էլեկտրոֆորեզում amino black 10B-ը սովորաբար օգտագործվում է շիճուկի տարբեր սպիտակուցային բաղադրիչների նկատմամբ իր ուժեղ ներկման հարաբերակցության և դրա կայունության պատճառով:
Երրորդ, պետք է ընտրել հուսալի որակի ներկեր:Որոշ ներկեր, չնայած նույն անունն ունենալուն, կարող են պարունակել կեղտեր, որոնք ներկելուց հետո առաջանում են հատկապես մուգ ֆոն:Սա կարող է նույնիսկ պղտորել սկզբնապես լավ բաժանված ժապավենները՝ դժվարացնելով դրանք տարբերել:
Ի վերջո, կարևոր է ներկման լուծույթի կոնցենտրացիայի ընտրությունը:Տեսականորեն կարող է թվալ, որ ներկման լուծույթի ավելի բարձր կոնցենտրացիան կհանգեցնի նմուշի բաղադրիչների ավելի մանրակրկիտ ներկման և ներկման ավելի լավ արդյունքների:Սակայն դա այդպես չէ։Նմուշի բաղադրիչների և ներկանյութի միջև կապակցման կապն ունի որոշակի սահման, որը չի ավելանում ներկման լուծույթի կոնցենտրացիայի ավելացման հետ:Ընդհակառակը, ներկող լուծույթի չափազանց բարձր կոնցենտրացիան ոչ միայն վատնում է ներկը, այլև դժվարացնում է հստակ ֆոն ձեռք բերելը:Ավելին, երբ գույնի ինտենսիվությունը հասնում է որոշակի առավելագույն արժեքի, ներկանյութի ներծծման կորը չի հետևում գծային հարաբերություններին, հատկապես քանակական չափումներում: Ցելյուլոզացետատային թաղանթային էլեկտրոֆորեզում ներկման լուծույթի կոնցենտրացիան սովորաբար ավելի ցածր է, քան թղթի էլեկտրոֆորեզում օգտագործվողը:
Մանրամասներ Պեկին Լիուի կենսատեխնոլոգիայի մասին իմանալու համար's ցելյուլոզային ացետատ թաղանթէլեկտրոֆորեզի բաքը և դրա էլեկտրոֆորեզի կիրառումը, խնդրում ենք այցելել այստեղ.
լՑելյուլոզային ացետատ թաղանթով շիճուկի սպիտակուցի տարանջատման փորձ
լՑելյուլոզային ացետատի մեմբրանի էլեկտրոֆորեզ
Եթե ունեք մեր արտադրանքի գնումների որևէ ծրագիր, խնդրում ենք մի հապաղեք կապվել մեզ հետ:Դուք կարող եք մեզ հաղորդագրություն ուղարկել էլ[էլփոստը պաշտպանված է]կամ[էլփոստը պաշտպանված է], կամ խնդրում ենք զանգահարել մեզ +86 15810650221 կամ ավելացնել Whatsapp +86 15810650221, կամ Wechat՝ 15810650221:
Հղում:Էլեկտրոֆորեզ (երկրորդ հրատարակություն) պարոն Լի
Հրապարակման ժամանակը՝ հունիս-06-2023