Շիճուկի սպիտակուցի տարանջատման փորձ ցելյուլոզային ացետատի մեմբրանի էլեկտրոֆորեզով

Սկզբունք

Ցելյուլոզային ացետատային թաղանթի էլեկտրոֆորեզը էլեկտրոֆորեզի մեթոդ է, որն օգտագործվում է բջջանյութի ացետատի թաղանթ՝ որպես աջակցություն:Այն երևույթը, երբ լիցքավորված մասնիկները էլեկտրական դաշտի ազդեցությամբ շարժվում են դեպի հակառակ էլեկտրոդը, կոչվում է էլեկտրոֆորեզ։Քանի որ յուրաքանչյուր սպիտակուց ունի որոշակի իզոէլեկտրական կետ, եթե սպիտակուցը տեղադրվի իր իզոէլեկտրական կետից ցածր pH լուծույթի մեջ, ապա սպիտակուցը դրական լիցքավորված կլինի և կտեղափոխվի դեպի բացասական էլեկտրոդ:Ընդհակառակը, այն շարժվում է դեպի դրական բևեռ։Քանի որ էլեկտրական դաշտում շարժվող սպիտակուցի մոլեկուլների արագությունը կապված է դրանց լիցքի, մոլեկուլների ձևի և չափի հետ, տարբեր սպիտակուցներ կարող են առանձնացվել էլեկտրոֆորեզով:Շիճուկը պարունակում է մի շարք սպիտակուցներ, որոնք բոլորն ունեն իզոէլեկտրական կետեր pH 7,5 կամ ավելի ցածր մակարդակում:Երբ շիճուկը տեղադրվում է pH 8.6 բուֆերում՝ էլեկտրոֆորեզ իրականացնելու համար, շիճուկի բոլոր սպիտակուցները բացասաբար են լիցքավորված և շարժվելու են դեպի դրական կողմը էլեկտրական դաշտում:Քանի որ շիճուկի տարբեր սպիտակուցներ ունեն տարբեր լիցքեր նույն pH-ով, մոլեկուլային մասնիկները տարբեր են չափերով, և, հետևաբար, միգրացիայի արագությունը տարբեր է, և դրանք բաժանվում են էլեկտրոֆորեզով:Շիճուկի սպիտակուցների իզոէլեկտրական կետերը և մոլեկուլային կշիռները ներկայացված են ստորև բերված աղյուսակում.

Սպիտակուցներ

Իզոէլեկտրական կետեր (PI)

Մոլեկուլային քաշը

Ալբոմին

4.88

69 000

α1-գլուլին

5.00

200 000

α2-գլուլին

5.06

300 000

β-գլուլին

5.12

9 000-150 000

γ-գլուլին

6,85~7,50

156 000-300 000

1

Փորձը ներառում է արյան շիճուկում տարբեր սպիտակուցների առանձնացումը ցելյուլոզացետատ թաղանթով (կրճատ. CAM) որպես օժանդակ միջավայր:CAM-ը մի տեսակ փրփրած լոս էeլավ համազգեստով թաղանթ, իսկ հաստությունը 0,1մմ-1,5մմ է, որն ունի որոշակի ջրի կլանում։

Նյութեր, գործիքներ և ռեակտիվներ CAM էլեկտրոֆորեզի համար

Նմուշներ:առողջ մարդու արյան շիճուկ

Գործիք:էլեկտրամատակարարում DYY-6C, էլեկտրոֆորեզի բաք DYCP-38C, նմուշի գերազանց բեռնում WD-9404

1-4

Ռեակտիվները

1) ցելյուլոզացետատ թաղանթ 7X9սմ

2) PH 8.6 բարբիտոլի բուֆերային լուծույթ (իոնային ուժը 0.05-0.09, 0.06 ժամանակն է): Վերցրեք 1,84 գ դիէթիլ բարբիթուրաթթու, այնուհետև վերցրեք 1.03 գ դիէթիլ նատրիումի պենտոբարբիտալ, ավելացրեք մի քիչ թորած ջուր, որպեսզի տաքանա, որպեսզի լուծվի և պատրաստեք: մինչև 1000 մլ;

3) բիծ: Ponceau S 0,2գ, Տրիքլորաքացախ 3գ, ավելացնել 100մլ թորած ջուր;

4) TBS/T կամ PBS/T՝ 45մլ 95% էթանոլ, 5մլ սառցադաշտային քացախաթթու, ավելացնել 50մլ թորած ջուր;

5) Մաքրող լուծույթ՝ 70 մլ անջուր էթանոլ, 30 մլ սառցադաշտային քացախաթթու:

Փորձի մեթոդd

1) Պատրաստել թաղանթը. թաղանթն ընկղմել բարբիտոլի բուֆերային լուծույթի մեջ 30 րոպե-8ժ. և հանել, ներծծող թղթով հեռացնել ավելորդ լուծույթը։

2) Նմուշների բեռնում. Տարբերեք թաղանթի կոպիտ կողմն ու հարթ կողմը, և կոպիտ կողմում նշեք գիծ մինչև վերին ծայրը 1,5 սմ հեռավորության վրա:Նմուշները բեռնեք բարձրակարգ նմուշի բեռնման գործիքով կոպիտ կողմում:Նշում. Նմուշները պետք է բեռնված լինեն թաղանթի կոպիտ կողմում:Շիճուկի նմուշները թաղանթ ամբողջությամբ ներթափանցելուց հետո թաղանթը շուռ տալով, կոպիտ կողմը (նմուշներով) դնել դեպի ցած դեպի բաքը, իսկ նմուշների վերջը դրվում է բացասական էլեկտրոդի մեջ:

3) Էլեկտրոֆորեզ՝ միացնել էլեկտրասնուցումը, 0.40.6մ A/cm թաղանթ, աշխատանքի ժամանակը 30-45ր.Էլեկտրաֆորեզը գործարկելուց հետո անջատեք հոսանքը:

4) Կեղտոտել և մաքրել. հանել թաղանթը բաքից և ընկղմելit ներկի լուծույթի մեջ 5 րոպե, այնուհետև մաքրել այն մաքրող լուծույթի մեջ նորից ու նորից 3-4 անգամ, մինչև ֆոնի գույնը պարզ լինի:Շիճուկի սպիտակուցները պետք է ցուցադրվեն շերտերի վրա, և սովորաբար կան հինգ գոտիներ, որոնք կազմում են նշված գծի վերին ծայրը, Ալբումին, α1-գլուլին, α2-գլուլին, β-գլուլին, γ-գլուլին:

5) Պահպանում՝ դնել չոր էլեկտրոֆորեզընվագախումբ10-15 րոպե մաքրող լուծույթի մեջ, այնուհետև հանել և կպցնել մաքուր ապակու վրա, չորանալուց հետո կդառնա թափանցիկ թաղանթ:նվագախումբ.

ՓորձարկումԱրդյունք

1-3

Շիճուկի նմուշների տարանջատման ազդեցությունը լավ է, և ժապավենի պոչամբարի երևույթ չկա:Արդյունքների կրկնելիությունը տատանվում է փորձարկման ընթացակարգերի և փորձարարի մեթոդների պատճառով, և կրկնելիությունը բարձր է:

Եզրակացություն

Արագ կլինիկական էլեկտրոֆորեզի հայտնաբերման համակարգ (Էլեկտրոֆորեզի բաքDYCP-38C,էլեկտրամատակարարումDYY-6C և բարձրակարգ նմուշի բեռնում WD-9404) արտադրված մեր կողմիցընկերությունը Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdհամապատասխանում է փորձարարական պահանջներին,ևարդյունքները վերարտադրելի են, պարզ և արագ, հարմարուսուցումհետազոտություն.

Պեկին ԼիույBiotechnology Co., Ltd-ն մասնագիտացած է կենսաբանական արդյունաբերության համար էլեկտրաֆորեզի արտադրանքի արտադրության մեջ, որըունի ավելի քան 50 տարվա պատմություն Չինաստանում, և ընկերությունը կարող է ապահովել կայուն և բարձրորակ արտադրանք ամբողջ աշխարհում:Տարիների զարգացման ընթացքում այն ​​արժանի է ձեր ընտրությանը:

Այժմ մենք փնտրում ենք գործընկերներ, ինչպես OEM էլեկտրոֆորեզի տանկը, այնպես էլ դիստրիբյուտորները ողջունվում են:

Մեր մասին լրացուցիչ տեղեկությունների համար դիմեք մեզ էլ[էլփոստը պաշտպանված է]կամ[էլփոստը պաշտպանված է].


Հրապարակման ժամանակը՝ նոյ-14-2022