Comet Assay-ը (Single Cell Gel Electrophoresis, SCGE) զգայուն և արագ տեխնիկա է, որը հիմնականում օգտագործվում է առանձին բջիջներում ԴՆԹ-ի վնասը հայտնաբերելու և վերականգնելու համար: «Comet Assay» անվանումը գալիս է արդյունքներում հայտնված գիսաստղի նման բնորոշ ձևից. բջջի միջուկը կազմում է «գլուխը», մինչդեռ վնասված ԴՆԹ-ի բեկորները գաղթում են՝ ստեղծելով գիսաստղի նմանվող «պոչ»:
Սկզբունք
Comet Assay-ի սկզբունքը հիմնված է ԴՆԹ-ի բեկորների միգրացիայի վրա էլեկտրական դաշտում: Անխախտ ԴՆԹ-ն մնում է բջջի միջուկում, մինչդեռ վնասված կամ մասնատված ԴՆԹ-ն գաղթում է դեպի անոդ՝ ձևավորելով գիսաստղի «պոչը»։ Պոչի երկարությունը և ինտենսիվությունը ուղիղ համեմատական են ԴՆԹ-ի վնասման չափին:
Ընթացակարգը
- Բջիջների պատրաստումՓորձարկվող բջիջները խառնվում են ցածր հալման կետով ագարոզայի հետ և տարածվում մանրադիտակի սլայդների վրա՝ ձևավորելով միասնական շերտ:
- Բջջային ԼիզիսՍլայդները ընկղմվում են լիզի լուծույթի մեջ՝ հեռացնելու բջջային թաղանթը և միջուկային թաղանթը՝ մերկացնելով ԴՆԹ-ն:
- ԷլեկտրոֆորեզՍլայդները տեղադրվում են էլեկտրոֆորեզի խցիկում ալկալային կամ չեզոք պայմաններում: Վնասված ԴՆԹ-ի բեկորները էլեկտրական դաշտի ազդեցության տակ գաղթում են դեպի դրական էլեկտրոդ:
- ԳունավորումԷլեկտրաֆորեզից հետո սլայդները ներկվում են լյումինեսցենտային ներկով (օրինակ՝ էթիդիումի բրոմիդ)՝ ԴՆԹ-ն պատկերացնելու համար:
- Մանրադիտակային վերլուծությունՕգտագործելով լյումինեսցենտային մանրադիտակ կամ մասնագիտացված ծրագրաշար, գիսաստղի ձևերը վերլուծվում են, և չափվում են այնպիսի պարամետրեր, ինչպիսիք են պոչի երկարությունը և ինտենսիվությունը:
Պատկեր biorender-ից
Տվյալների վերլուծություն
Comet Assay-ի արդյունքները գնահատվում են մի քանի հիմնական պարամետրերի հիման վրա.
- Պոչի երկարությունըՆերկայացնում է ԴՆԹ-ի գաղթած հեռավորությունը՝ ցույց տալով ԴՆԹ-ի վնասման չափը:
- Պոչի ԴՆԹ-ի բովանդակությունըԴՆԹ-ի տոկոսը, որը գաղթում է դեպի պոչը, որը հաճախ օգտագործվում է որպես ԴՆԹ-ի վնասի քանակական չափում:
- Olive Tail Moment (OTM)Համատեղում է և՛ պոչի երկարությունը, և՛ պոչի ԴՆԹ-ի պարունակությունը՝ ապահովելով ԴՆԹ-ի վնասի ավելի ամբողջական չափումը:
Դիմումներ
- Գենոտոքսիկության ուսումնասիրություններComet Assay-ը լայնորեն օգտագործվում է բջիջների ԴՆԹ-ի վրա քիմիական նյութերի, դեղամիջոցների և ճառագայթման ազդեցությունը գնահատելու համար՝ դարձնելով այն գենոտոքսիկության փորձարկման հիմնական գործիք:
- Շրջակա միջավայրի թունաբանությունԱյն օգնում է վերլուծել շրջակա միջավայրի աղտոտիչների ազդեցությունը օրգանիզմների ԴՆԹ-ի վրա՝ տրամադրելով պատկերացումներ էկոհամակարգի անվտանգության վերաբերյալ:
- Բժշկական և կլինիկական հետազոտություններComet Assay-ն օգտագործվում է ԴՆԹ-ի վերականգնման մեխանիզմների, քաղցկեղի և ԴՆԹ-ի հետ կապված այլ հիվանդությունների ուսումնասիրության համար: Այն նաև գնահատում է քաղցկեղի թերապիայի ազդեցությունը, ինչպիսիք են ռադիոթերապիան և քիմիաթերապիան, ԴՆԹ-ի վրա:
- Պարենի և գյուղատնտեսության գիտություններՕգտագործվում է թունաքիմիկատների, սննդային հավելումների և այլ նյութերի անվտանգությունը գնահատելու և կենդանիների մոդելներում դրանց թունավոր ազդեցություններն ուսումնասիրելու համար:
Առավելությունները
- Բարձր զգայունությունԴՆԹ-ի վնասի ցածր մակարդակ հայտնաբերելու ունակություն:
- Պարզ գործողությունՏեխնիկան պարզ է, ինչը հարմար է դարձնում բարձր թողունակության ցուցադրման համար:
- Լայն ԴիմումԱյն կարող է կիրառվել տարբեր տեսակի բջիջների վրա, ներառյալ կենդանական և բուսական բջիջները:
- Քանակականացման մարտահրավերներԴՆԹ-ի վնասների վերաբերյալ որակական տվյալներ տրամադրելով, քանակական վերլուծությունը մեծապես հիմնված է ծրագրային ապահովման և պատկերների վերլուծության տեխնիկայի վրա:
- Փորձարարական պայմաններԱրդյունքների վրա կարող են ազդել այնպիսի գործոններ, ինչպիսիք են էլեկտրոֆորեզի ժամանակը և pH-ը, որոնք պահանջում են փորձարարական պայմանների մանրակրկիտ վերահսկողություն:
Սահմանափակումներ
Comet Assay-ը անգնահատելի գործիք է կենսաբժշկական հետազոտությունների, բնապահպանական գիտության և դեղերի մշակման մեջ՝ շնորհիվ իր ճկունության և բարձր զգայունության ԴՆԹ-ի վնասը հայտնաբերելու և վերականգնելու հարցում: Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology)առաջարկում է հորիզոնական էլեկտրոֆորեզի խցիկ գիսաստղերի վերլուծության համար: Բարի գալուստ կապ հաստատել մեզ հետ՝ քննարկելու այդ մասինԳիսաստղի փորձարկումարձանագրություն։
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) մասնագիտացած է էլեկտրոֆորեզի գործիքների արտադրության մեջ ավելի քան 50 տարի մեր սեփական պրոֆեսիոնալ տեխնիկական թիմի և R&D կենտրոնի հետ: Մենք ունենք հուսալի և ամբողջական արտադրական գիծ՝ դիզայնից մինչև ստուգում, և պահեստ, ինչպես նաև շուկայավարման աջակցություն: Մեր հիմնական արտադրանքներն են Էլեկտրոֆորեզի բջիջը (բաք/խցիկ), էլեկտրաֆորեզի սնուցման աղբյուր, կապույտ LED տրանսլյումինատոր, ուլտրամանուշակագույն տրանսլյումինատոր, գել պատկերի և վերլուծության համակարգ և այլն:
Եթե ունեք մեր արտադրանքի գնումների որևէ ծրագիր, խնդրում ենք մի հապաղեք կապվել մեզ հետ: Դուք կարող եք մեզ հաղորդագրություն ուղարկել էլ[էլփոստը պաշտպանված է]կամ[էլփոստը պաշտպանված է], կամ խնդրում ենք զանգահարել մեզ +86 15810650221 կամ ավելացնել Whatsapp +86 15810650221, կամ Wechat՝ 15810650221:
Խնդրում ենք սկանավորել QR կոդը՝ Whatsapp-ում կամ WeChat-ում ավելացնելու համար:
Հրապարակման ժամանակը` 20-20-2024