Գելային էլեկտրոֆորեզի օպտիմալացում. նմուշի ծավալի, լարման և ժամանակի լավագույն փորձը

Ներածություն

Գելային էլեկտրոֆորեզը մոլեկուլային կենսաբանության հիմնարար տեխնիկա է, որը լայնորեն օգտագործվում է սպիտակուցների, նուկլեինաթթուների և այլ մակրոմոլեկուլների բաժանման համար: Նմուշի ծավալի, լարման և էլեկտրոֆորեզի ժամանակի ճիշտ վերահսկումը չափազանց կարևոր է ճշգրիտ և վերարտադրելի արդյունքների հասնելու համար:Մեր լաբորատոր գործընկերն առաջարկում էSDS-PAGE գել էլեկտրոֆորեզի ժամանակ այս պարամետրերը կառավարելու լավագույն փորձը:

Beijing Liuyi Biotechnology գել էլեկտրոֆորեզի արտադրանք

Նմուշի ծավալը՝ հետևողականության ապահովում

SDS-PAGE էլեկտրոֆորեզ կատարելիս նմուշի ծավալը առանցքային գործոն է, որը կարող է էապես ազդել ձեր արդյունքների լուծման վրա: Ընդհանուր առմամբ խորհուրդ է տրվում բեռնել 10 µL ընդհանուր սպիտակուց մեկ ջրհորի մեջ: Համապատասխանություն ապահովելու և հարակից հորերի միջև նմուշի տարածումը կանխելու համար կարևոր է ցանկացած դատարկ հորում բեռնել 1x բեռնման բուֆերի հավասար ծավալ: Այս նախազգուշական միջոցը օգնում է կանխել նմուշների տարածումը հարևան գոտիներում, ինչը կարող է առաջանալ, եթե ջրհորը դատարկ մնա:

Նախքան ձեր նմուշները բեռնելը, միշտ սկսեք մեկ ջրհորի վրա մոլեկուլային քաշի մարկեր ավելացնելով: Սա թույլ է տալիս էլեկտրոֆորեզից հետո պարզել սպիտակուցի չափերը:

Լարման կառավարում. հավասարակշռող արագություն և բանաձև

Էլեկտրաֆորեզի ժամանակ կիրառվող լարումը ուղղակիորեն ազդում է ինչպես արագության վրա, որով նմուշները գաղթում են գելի միջով, այնպես էլ տարանջատման լուծույթին: SDS-PAGE-ի համար խորհուրդ է տրվում սկսել մոտ 80 Վ ցածր լարումից: Այս սկզբնական ցածր լարումը թույլ է տալիս նմուշներին դանդաղ և հավասարաչափ գաղթել՝ դրանք կենտրոնացնելով սուր շերտի մեջ, երբ նրանք մտնում են բաժանարար գել:

Երբ նմուշները լիովին մտնեն բաժանարար գել, լարումը կարող է ավելացվել մինչև 120 Վ: Այս բարձր լարումը արագացնում է միգրացիան՝ ապահովելով, որ սպիտակուցներն արդյունավետորեն բաժանվում են՝ ըստ իրենց մոլեկուլային քաշի: Կարևոր է վերահսկել բրոմֆենոլ կապույտ ներկի առաջընթացը, որը ցույց է տալիս էլեկտրոֆորեզի ավարտը: 10-12% կոնցենտրացիայով գելերի համար սովորաբար բավարար է 80-90 րոպե; սակայն, 15% գելերի դեպքում, գուցե անհրաժեշտ լինի մի փոքր երկարացնել գործարկման ժամանակը:

Ժամանակի կառավարում. Իմանալով, թե երբ պետք է դադարեցնել

Ժամկետը ևս մեկ կարևոր գործոն է գելային էլեկտրոֆորեզում: Գելը չափազանց երկար կամ շատ կարճ ժամանակով աշխատեցնելը կարող է հանգեցնել ոչ օպտիմալ բաժանման: Բրոմֆենոլ կապույտ ներկի միգրացիան օգտակար ցուցանիշ է. երբ այն հասնում է գելի հատակին, սովորաբար ժամանակն է դադարեցնել վազքը: Ստանդարտ գելերի համար, ինչպիսիք են 10-12%, էլեկտրոֆորեզի տեւողությունը մոտ 80-90 րոպե սովորաբար բավարար է: Ավելի բարձր տոկոսային գելերի դեպքում, օրինակ՝ 15%, գործարկման ժամանակը պետք է երկարացվի՝ ապահովելու սպիտակուցների ամբողջական տարանջատումը:

Բուֆերների կառավարում. բուֆերների վերաօգտագործում և պատրաստում

Էլեկտրոֆորեզի բուֆերը կարող է կրկին օգտագործվել 1-2 անգամ՝ կախված ձեր լաբորատորիայի հատուկ պայմաններից: Այնուամենայնիվ, օպտիմալ արդյունքների համար խորհուրդ է տրվում պատրաստել թարմ 10x բուֆեր և նոսրացնել այն օգտագործելուց անմիջապես առաջ: Սա ապահովում է, որ բուֆերը պահպանում է իր արդյունավետությունը՝ հանգեցնելով էլեկտրոֆորեզի ավելի հուսալի արդյունքների:

Beijing Liuyi Biotechnology գել էլեկտրոֆորեզի արտադրանք

Զգուշորեն վերահսկելով նմուշի ծավալը, լարումը և էլեկտրոֆորեզի ժամանակը, դուք կարող եք զգալիորեն բարելավել ձեր գել էլեկտրոֆորեզի արդյունքների ճշգրտությունն ու վերարտադրելիությունը: Այս լավագույն փորձի կիրառումը ձեր լաբորատոր աշխատանքում կօգնի ձեզ հասնել ավելի հստակ և հստակ գոտիներ, ինչը կհանգեցնի ավելի լավ տվյալների ներքևի վերլուծության համար:

Եթե ​​դուք ունեք գել էլեկտրոֆորեզի փորձի օպտիմալացման ավելի լավ մեթոդներ, համեցեք քննարկել մեզ հետ:

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) մասնագիտացած է էլեկտրոֆորեզի գործիքների արտադրության մեջ ավելի քան 50 տարի մեր սեփական պրոֆեսիոնալ տեխնիկական թիմի և R&D կենտրոնի հետ: Մենք ունենք հուսալի և ամբողջական արտադրական գիծ՝ դիզայնից մինչև ստուգում, և պահեստ, ինչպես նաև շուկայավարման աջակցություն: Մեր հիմնական արտադրանքներն են Էլեկտրոֆորեզի բջիջը (բաք/խցիկ), էլեկտրաֆորեզի սնուցման աղբյուր, կապույտ LED տրանսլյումինատոր, ուլտրամանուշակագույն տրանսլյումինատոր, գել պատկերի և վերլուծության համակարգ և այլն:

Եթե ​​ունեք մեր արտադրանքի գնումների որևէ ծրագիր, խնդրում ենք մի հապաղեք կապվել մեզ հետ: Դուք կարող եք մեզ հաղորդագրություն ուղարկել էլ[էլփոստը պաշտպանված է]կամ[էլփոստը պաշտպանված է], կամ խնդրում ենք զանգահարել մեզ +86 15810650221 կամ ավելացնել Whatsapp +86 15810650221, կամ Wechat՝ 15810650221:

Խնդրում ենք սկանավորել QR կոդը՝ Whatsapp-ում կամ WeChat-ում ավելացնելու համար: