1. Դասակարգում
Գելային էլեկտրոֆորեզը բաժանվում է ուղղահայաց տեսակների (ներառյալ սյունակային գելեր և սալաքարային գելեր) և հորիզոնական տեսակների (հիմնականում սալաքարային գելեր) (Նկար 6-18): Ընդհանուր առմամբ, ուղղահայաց տարանջատումը մի փոքր գերազանցում է հորիզոնականը, սակայն հորիզոնական գելի պատրաստումն ունի առնվազն չորս առավելություն. հնարավոր է պատրաստել տարբեր բնութագրերի ագարոզայի գել թիթեղներ. գելի պատրաստումը և նմուշի բեռնումը ավելի հարմար են. էլեկտրոֆորեզի խցիկը հեշտ է կառուցել և ծախսարդյունավետ: Քանի որ հորիզոնական էլեկտրոֆորեզն իրականացվում է ագարոզայի գելային թիթեղով ամբողջությամբ ընկղմված էլեկտրոֆորեզի բուֆերի մակերեսից մոտ 1 մմ ներքև, այն նաև կոչվում է սուզվող էլեկտրոֆորեզ:
Էլեկտրոֆորեզի բաք DYCP-31DN ագարոզայի գելային էլեկտրոֆորեզի համար
2.Բուֆերային համակարգ
Նուկլեինաթթուների տարանջատման ժամանակ համակարգերի մեծ մասն ընդունում է շարունակական համակարգեր: Սովորաբար օգտագործվող էլեկտրաֆորեզի բուֆերները ներառում են TBE (0,08 մոլ/լ Տրիս· HCl, pH 8,5, 0,08 մոլ/լ բորաթթու, 0,0024 մոլ/լ EDTA) բուֆեր և THE (0,04 մոլ/լ Տրիս· HCl, pH 7,8, 0,02 մլ): նատրիումի ացետատ, 0.0018 մոլ/լ EDTA) բուֆեր։ Այս բուֆերները սովորաբար պատրաստվում են որպես 10x պաշարային լուծույթներ և օգտագործման ժամանակ նոսրացվում են մինչև անհրաժեշտ կոնցենտրացիան: Գծային և շրջանաձև ԴՆԹ-ի միգրացիայի արագությունները ագարոզայի գելում տարբերվում են՝ կախված օգտագործվող բուֆերից: THE բուֆերում գծային ԴՆԹ-ի միգրացիայի արագությունն ավելի մեծ է, քան շրջանաձև ԴՆԹ-ի, մինչդեռ TBE բուֆերում հակառակն է:
3.Ագարոզայի գելի պատրաստում
(1) Հորիզոնական ագարոզայի գելի պատրաստում
ա) Պատրաստեք ագարոզայի գելի անհրաժեշտ կոնցենտրացիան՝ օգտագործելով 1x էլեկտրոֆորեզի բուֆեր:
բ) Ագարոզը տաքացնել մինչև ամբողջական լուծարումը կամ եռացող ջրային բաղնիքում, մագնիսական խառնիչի վրա կամ միկրոալիքային վառարանում: Ագարոզայի լուծույթը սառեցրեք մինչև 55°C և ավելացրեք էթիդիումի բրոմիդ (EB) ներկ մինչև 0,5 մկգ/մլ վերջնական կոնցենտրացիան:
(գ) Ապակե կամ ակրիլային թիթեղների եզրերը փակեք փոքր քանակությամբ ագարոզայի գելով, ավելացրեք սանր և տեղադրեք սանրի ատամները ափսեից մոտ 0,5-1,0 մմ բարձրության վրա:
դ) հալված ագարոզայի գելի լուծույթը շարունակաբար լցնել ապակու կամ ակրիլային ափսեի կաղապարի մեջ (հաստությունը կախված է ԴՆԹ-ի նմուշի ծավալից)՝ խուսափելով օդային փուչիկների ներթափանցումից: Թողեք, որ այն բնական կերպով պնդանա սենյակային ջերմաստիճանում։
ե) Զգուշորեն հեռացրեք սանրը ամբողջական ամրացումից հետո: Գելի բաքին ավելացրեք էլեկտրոֆորեզի բուֆերի համապատասխան քանակություն՝ համոզվելով, որ գելային թիթեղը ընկղմված է էլեկտրաֆորեզի բուֆերի մակերեսից մոտ 1 մմ ներքև:
(2) Ուղղահայաց ագարոզայի գելի պատրաստում
ա) Ապակե ափսեներից հեռացրեք ճարպը կամ մնացորդը՝ լվանալով էթանոլով:
բ) Առջևի և հետևի պատնեշների միջև տեղադրեք միջակայքային թիթեղները, հարթեցրեք միջնապատերի եզրերը առջևի և հետևի պատնեշների հետ և ամրացրեք դրանք սեղմակներով:
գ) 2% ագարոզա ավելացրեք 1x բուֆերային միջակայքի ափսեների եզրերի միջև՝ գել ձուլման խցիկի ներքևում 1 սմ բարձրությամբ ագարոզայի խցան ձևավորելու համար:
դ) Լցնել հալված ագարոզայի գելը ցանկալի կոնցենտրացիայի մեջ, որը պատրաստված է 1x բուֆերի մեջ, վերևից մինչև 1 սմ ցածր գելի խցիկի մեջ:
ե) Տեղադրեք սանրը՝ խուսափելով սանրի ատամների տակ օդային փուչիկները փակելուց: Երբեմն սանրի ատամների մոտ կնճիռներ կարող են առաջանալ ագարոզայի գելի սառեցման ժամանակ; Նման դեպքերում պարզապես վերևում մի քիչ հալված ագարոզա ավելացրեք՝ այն ամրացնելու համար:
զ) Հեռացրեք սանրը: Բեռնման անցքում բուֆերի արտահոսքը կանխելու համար ագարոզայի գելային ափսեի և էլեկտրոֆորեզի խցիկի միջև կապը փակեք 2% ագարոզով և ավելացրեք անհրաժեշտ քանակությամբ բուֆեր:
(է) Գելային խցիկին ավելացրեք 1x էլեկտրոֆորեզի բուֆեր:
(ը) Զգուշորեն լցրեք ԴՆԹ-ի նմուշները բուֆերի տակ գտնվող ագարոզայի գելի վրա:
Ագարոզայի գել էլեկտրոֆորեզի մասին հիմնական գիտելիքների մասին լրացուցիչ տեղեկություններ կկիսվենք հաջորդ շաբաթ: Ցանկանում եմ, որ այս տեղեկատվությունը օգտակար լինի ձեր փորձի համար:
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) մասնագիտացած է էլեկտրոֆորեզի գործիքների արտադրության մեջ ավելի քան 50 տարի մեր սեփական պրոֆեսիոնալ տեխնիկական թիմի և R&D կենտրոնի հետ: Մենք ունենք հուսալի և ամբողջական արտադրական գիծ՝ դիզայնից մինչև ստուգում, և պահեստ, ինչպես նաև շուկայավարման աջակցություն: Մեր հիմնական արտադրանքներն են էլեկտրոֆորեզի բջիջը (բաք/խցիկ), էլեկտրաֆորեզի սնուցման աղբյուր, կապույտ LED տրանսլյումինատոր, ուլտրամանուշակագույն տրանսլյումինատոր, գել պատկերի և վերլուծության համակարգ և այլն:
Այժմ մենք փնտրում ենք գործընկերներ, ինչպես OEM էլեկտրոֆորեզի տանկը, այնպես էլ դիստրիբյուտորները ողջունվում են:
Եթե ունեք մեր արտադրանքի գնումների որևէ ծրագիր, խնդրում ենք մի հապաղեք կապվել մեզ հետ: Դուք կարող եք մեզ հաղորդագրություն ուղարկել էլ[էլփոստը պաշտպանված է]կամ[էլփոստը պաշտպանված է], կամ խնդրում ենք զանգահարել մեզ +86 15810650221 կամ ավելացնել Whatsapp +86 15810650221, կամ Wechat՝ 15810650221:
Խնդրում ենք սկանավորել QR կոդը՝ Whatsapp-ում կամ WeChat-ում ավելացնելու համար:
Հրապարակման ժամանակը՝ Dec-07-2023